ICS 65.020 B 15 DB11 北 京 市 地 方 标 准 DB 11/T 1129—2014 生物防治产品应用技术规程 杨扇舟蛾颗粒体病毒 Technical regulation for applying of biocontrol production Clostera anachoreta (Denis & Schiffermüler) Granulosis Virus 2014 - 11 - 05 发布 北京市质量技术监督局 2015 - 03 - 01 实施 发 布 DB11/T 1129—2014 前 言 本标准按照 GB/T 1.1—2009 给出的规则起草。 本标准由北京市园林绿化局提出并归口。 本标准由北京市园林绿化局组织实施。 本标准起草单位：北京市西山试验林场、北京市林业保护站。 本标准主要起草人：梁洪柱、陈倩、周荣伍、颜容、宁少华、张玉博。 I DB11/T 1129—2014 生物防治产品应用技术规程 杨扇舟蛾颗粒体病毒 1 范围 本标准规定了杨扇舟蛾颗粒体病毒（Clostera anachoreta (Denis & Schiffermüller) Granulosis Virus，简称CaGV）的防治对象、防治适期、使用剂量、施用方式、效果调查方法。 本标准适用于北京地区利用杨扇舟蛾颗粒体病毒防治杨扇舟蛾幼虫。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 杨扇舟蛾 Clostera anachoreta (Denis & Schiffermüller) 异名：Pygaera anachoreta pallida Staudinger，Pygaera mahatma Bryk。 别名：白杨天社蛾、白杨灰天社蛾、杨树天社蛾、小叶杨天社蛾。 属鳞翅目Lepidopera舟蛾科Notodontidae。危害杨属Polulus和柳属Salix植物。识别特征参见附录 A。 2.2 杨扇舟蛾颗粒体病毒 Clostera anachoreta (Denis & Schiffermüller) granulosis virus 一种具有较高宿主特异性的昆虫病毒。 2.3 多角体 polyhedral inclusion body（PIB） 包埋病毒粒子的包涵体，是表示病毒数量的单位。 2.4 制剂 pesticide perparation 所制成的某一含量和某一用途的产品。 3 CaGV 制剂的应用 3.1 防治对象 杨扇舟蛾幼虫。 1 DB11/T 1129—2014 3.2 制剂准备 参见附录 B。 3.3 防治适期 1龄～2龄低龄幼虫期防治为最佳。 每年物候差异较大，以当年各代虫情预测预报为准。在北京地区，正常年份，第1代低龄幼虫在5 月上中旬；第2代低龄幼虫在6月中下旬；第3代低龄幼虫在7月末～8月上旬；第4代低龄幼虫在8月末～9 月上旬。 3.4 使用剂量 11 防治低龄幼虫，每公顷用3.75×10 多角体（PIB）；防治其他龄期幼虫，用量加倍，即每公顷用7.5 11 ×10 PIB。 3.5 施用方式 杨扇舟蛾颗粒体病毒为胃毒剂，使用时应均匀喷洒到树叶上。具体使用方法见表 1。 表1 杨扇舟蛾颗粒体病毒制剂施用方式 喷雾类型 常量喷雾 低量喷雾 超低容量喷雾 低龄幼虫 其他龄期幼虫 稀释倍数 稀释倍数 地面喷雾 1000 500 飞机喷雾 30 15 地面喷雾 100 50 飞机喷雾 10 4 地面喷雾 4 1.5 地面喷雾/飞机喷雾 4 效果调查 4.1 调查内容 检查虫口减退率和成灾率，以此来表示防治效果。 4.2 调查时间 制剂喷洒后第15d调查一次。 4.3 调查方法 在幼虫发生期，针对杨扇舟蛾危害的杨属和柳属树木的树冠处进行调查。每个调查区以林班、行政 2 2 2 村或自然村为单位，划定标准地。按每50hm 不少于2块、每100hm 不少于5块、每500hm 不少于15块设置 标准地，调查防治前后的活虫数。标准地内随机选取20株作为标准株，逐一进行详查。 4.4 计算公式 虫口减退率及成灾率计算方法见公式（1）、（2）： 2 DB11/T 1129—2014 虫口减退率（%）= 成灾率（%）= 防治前活虫数 - 防治后活虫数 × 100 ····································(1) 防治前活虫数 成灾面积 × 1000 ···························································(2) 寄主总面积 3 DB11/T 1129—2014 AA 附 录 A （资料性附录） 杨扇舟蛾的形态特征 A.1 成虫 雌虫体长 15mm～20 mm，翅展 38mm～42mm；雄虫体长 13mm～17mm，翅展 23mm～37mm。灰褐色，前 翅顶角部分有一个深灰褐色的扇形斑，其下方有一较大黑点。 头顶至胸背中央有黑棕色条带。 A.2 卵 扁圆形，直径1mm，初产时橙红色，孵化时暗灰色，产于叶片背面或小枝上，单层排列。 A.3 幼虫 老熟时体长32mm～40mm。头黑褐色。全身密披灰黄色长毛；身体灰赭褐色，背面带淡黄绿色；背线、 气门上线和气门线暗褐色，气门上线较宽；每节两侧各有4个赭色小毛瘤，环形排列，其上有长毛。第1、 8腹节背面中央有1枣红色大瘤，其基部边缘黑色，两侧各伴有1个白点。 A.4 蛹 体长13mm～18mm，褐色，尾部有分叉的臀棘。所结茧为灰白色，椭圆形。 4 DB11/T 1129—2014 BB 附 录 B （资料性附录） 制剂准备 B.1 CaGV的室内增殖 B.1.1 增殖室条件 温度 25℃，光照 L：D=14:10，光源为白炽灯。 B.1.2 饲养植物 新鲜黑杨派杨树叶片。 B.1.3 饲养工具 透明塑料养虫杯，底直径3.5cm，顶直径5.0cm，杯高5.0cm。 B.1.4 增殖方法 在养虫杯内放入 15 头杨扇舟蛾初孵幼虫，每天喂饲新鲜杨树叶片。待幼虫发育至 3 龄末时，开始 6 喂饲带毒叶片（将新鲜叶片浸于浓度为 1.0×10 PIB/ml 的 CaGV 液体中 5s，取出后阴干），每天更换带 毒叶片。饲喂期间及时清理养虫杯内的虫粪，防止虫体感染杂菌。待 80%幼虫死亡时，收集所有幼虫， -10℃长期贮存。 B.2 CaGV的提纯 B.2.1 CaGV的提取 将 B.1.4 中收集的幼虫加 2 倍无菌水稀释，在高速组织捣碎机上，粉碎 3min 后取出，先用三层纱 布初步过滤，再用 80 目筛子进一步过滤，滤液用 16000r/min 离心机离心，滤液分为三层，上层清液为 水，弃之；中间浅褐色沉淀为病毒粗提物，保留；底部黑色沉淀为杂质，弃之。 B.2.2 粗提物的测定 取 1 克病毒粗提物稀释至 1000 倍，然后取 1ml 稀释液滴于血球计数板上，盖盖玻片，在显微镜 15 ×40 倍状态下计数，对角线取样，共取 80 小格，颗粒边缘不在同一小格内的不计，并按公式（B.1） 11 计算病毒内 PIB 含量。如果粗提物含量低于 1.25×10 PIB/ml，表明病毒粗提物中杂质含量过高，应加 2 倍无菌水混匀，重新离心提纯，除杂质，直至含量合格。 每克 PIB 含量=平均每格颗粒体数×400 万×1000· · ·· · · ·· · ······················ ·· · · · ·· ·· （B.1） 注：1000为稀释倍数。 B.3 CaGV制剂的配制和保存 5 DB11/T 1129—2014 B.3.1 配制 将 B.2.1 中含量合格的 CaGV 加 7%的盐水，与 50%中性甘油混合，三者重量比为 1：49：50，制成 甘油病毒悬液。 B.3.2 保存 避光、避紫外线照射。4℃，可保存 2 年；常温，可保存 6 个月。 B.4 CaGV制剂的质量检测 用多点抽样的方法，取1ml B.3.2中保存的甘油病毒悬液，按B.2.2中方法测定，CaGV制剂含量在1.25 9 ×10 PIB/ml以上，为合格。 6 DB11/T 1129—2014 参 考 文 献 [1] DB11/T 703—2010 美国白蛾综合防控技术规程 [2] DB43/T 151—2000 日本赤松毛虫质型多角体病毒及其杀虫剂（J-DSCPV）的质量、生产、使 用技术规程 [3] 萧刚柔主编 1992 中国森林昆虫第2版（增订本）北京：中国林业出版社 1016～1017 [4] 武春生 方承莱编著 2003 中国动物志昆虫纲第三十一卷鳞翅目舟蛾科 北京：科学出版社 802～804 [5] 包建中 古德祥编著 1998 中国生物防治 山西：山西科学技术出版社 437～440 _________________________________ 7