ICS 65.020.01 B 15 福 DB35 建 省 地 方 标 准 DB35/T 1911—2020 水稻品种稻瘟病（苗瘟）抗性 室内鉴定技术规范 Technical specification for greenhouse identification of rice resistance to rice blast 2020 - 06 - 29 发布 福建省市场监督管理局 2020 - 09 - 29 实施 发 布 DB35/T 1911—2020 目 次 前言 ................................................................................ II 1 范围 .............................................................................. 1 2 术语和定义 ........................................................................ 1 3 鉴定方法 .......................................................................... 1 3.1 鉴定圃设置 .................................................................... 1 3.2 育苗方法 ...................................................................... 1 3.3 接种体制备 .................................................................... 2 3.4 苗瘟接种方法 .................................................................. 2 3.5 调查方法 ...................................................................... 2 3.6 病情指数计算 .................................................................. 3 3.7 抗菌株率计算 .................................................................. 3 3.8 抗性等级划分 .................................................................. 3 3.9 鉴定结果 ...................................................................... 4 4 材料和土壤处理 .................................................................... 4 4.1 4.2 4.3 接种体 ........................................................................ 4 水稻植株 ...................................................................... 4 鉴定圃土壤 .................................................................... 4 附录 A（规范性附录） 水稻抗稻瘟病鉴定病情调查记载表 .................................. 5 附录 B（规范性附录） 水稻抗稻瘟病鉴定抗性等级记载表 .................................. 6 I DB35/T 1911—2020 前 言 本标准按照GB/T 1.1—2009给出的规则起草。 本标准由福建省农业科学院提出。 本标准由福建省农业农村厅归口。 本标准起草单位：福建省农业科学院植物保护研究所。 本标准主要起草人：石妞妞、杜宜新、阮宏椿、陈福如、杨秀娟、甘林、代玉立。 II DB35/T 1911—2020 水稻品种稻瘟病（苗瘟）抗性室内鉴定技术规范 1 范围 本标准规定了水稻品种抗稻瘟病（苗瘟）室内人工接种鉴定的术语和定义、鉴定方法、材料和土壤 处理方法。 本标准适用于水稻品种抗稻瘟病（苗瘟）的鉴定，用于评价水稻品种对稻瘟病的抗病性。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 稻瘟病 rice blast 由稻瘟病菌[Magnaporthe oryzae (Hebert) Barr.]侵染引起的一种流行性真菌病害。 2.2 苗瘟 seedling blast 水稻3叶期以后至移栽前秧苗叶片上发生的稻瘟病。 2.3 人工接种鉴定 artificial inoculation identification 在适宜条件下，通过人工操作将接种体接种于水稻植株上，判别水稻品种的抗病性的接种鉴定方法。 2.4 接种体 inoculum 用于人工接种鉴定的水稻稻瘟病菌分生孢子悬浮液。 2.5 喷雾接种 spray inoculation 将水稻稻瘟病菌分生孢子悬浮液喷雾至水稻叶片上，使水稻在适宜条件下感染稻瘟病菌的接种方 法。 2.6 对照品种 control variety 在鉴定水稻品种抗病性时设置的感病品种。 3 3.1 鉴定方法 鉴定圃设置 在可控温、控湿、控光的鉴定圃内设置20个以上的鉴定池。 3.2 育苗方法 播 种 前 60 d 将 鉴 定 池 内 土 壤 翻 晒 ， 播 种 前 20 d 施 肥 浸 泡 ， 鉴 定 池 每 平 方 米 施 复 合 肥 （N-P2O3-K2O:15-15-15）0.16 kg。播种前1 d平整鉴定池泥浆，排除积水，将各鉴定池划分为长20 cm、 1 DB35/T 1911—2020 宽10 cm的若干单元格。参鉴品种经浸种、催芽后按编号顺序播种于单元格，每一单元格内播种一个品 种，每个品种播种3丛，每丛10～15粒种子，随机插入对照品种，接种前3 d～5 d酌施氮肥。 3.3 接种体制备 3.3.1 培养基制备 淀粉培养基：将可溶性淀粉10 g、酵母浸膏2 g、碳酸钙3 g和琼脂18 g加入800 mL水中，加热至琼 脂融化，加水定容至1 000 mL，调节pH至6.5，在121 ℃下湿热灭菌25 min。 米糠培养基：将米糠20 g、琼脂20 g加入800 mL水中，加热至琼脂融化，加水定容至1 000 mL，调 节pH至6.5，在121 ℃下湿热灭菌25 min。 3.3.2 菌株选择 选择全省水稻主要种植区域内强致病力的稻瘟病菌菌株20株以上。 3.3.3 稻瘟病菌培养 将选择的稻瘟病菌菌株置于可溶性淀粉培养基平板上28 ℃恒温黑暗培养7 d，用灭菌的打孔器打取 5 mm的菌丝块，备用。将灭菌米糠培养基倒入直径9 cm灭菌培养皿，每皿倒入30 mL～40 mL米糠培养基， 制成米糠培养基平板，将菌丝块接种至米糠培养基平板上，28 ℃恒温黑暗培养10 d，用无菌毛笔刷除 表面菌丝体，将培养皿置于黑光灯下28 ℃保湿（相对湿度大于90%）培养72 h，每天光照时间为12 h （7:00至19:00）。 3.3.4 接种体 在光学显微镜下观察稻瘟病菌产孢情况，将稻瘟病菌分生孢子用无菌水洗下，用血球计数板将孢子 5 -1 浓度调节至约1×10 个·mL ，作为接种体。 3.4 苗瘟接种方法 水稻苗3～4叶期时，接种体中加入吐温80，使其在接种体中的浓度为0.1%（V/V），傍晚时采用空 压机（0.7 MPa）进行喷雾接种，鉴定池每平方米喷施接种体80 mL，每鉴定池喷施单个稻瘟病菌的接种 体，接种后覆盖黑色薄膜，25 ℃～28 ℃保湿培育（相对湿度大于95%）48 h后，打开薄膜两端通风， 接种72 h后移去薄膜，25 ℃～28 ℃保湿（相对湿度大于95%）培育。 3.5 调查方法 3.5.1 调查时间 接种后7 d～10 d，对照品种的发病程度达到7级及以上时开始调查。 3.5.2 调查方法 调查各参鉴品种所有植株的水稻叶片，以发病最严重叶片的病级作为该植株的发病级别，所有参鉴 品种在当天内调查完成，病情分级应符合表1的规定。 2 DB35/T 1911—2020 表1 水稻苗瘟病情分级表 病情级别 症状 0级 无病斑。 1级 针尖大小的褐点病斑。 3级 小圆形病斑，病斑直径 1 mm～2 mm，病斑面积小于叶片面积的 2%。 5级 典型纺锤形病斑，长 2 mm 以上，病斑面积占叶片面积的 2.1%～10.0%，或出现叶枕瘟。 7级 典型病斑，病斑面积占叶片面积的 10.1%～35.0%。 9级 典型病斑，病斑面积占叶片面积的 35%以上，或出现叶片枯萎。 3.5.3 病情记载 按照附录A记录参鉴品种稻瘟病病情。 3.6 病情指数计算 病情指数按公式（1）计算： D （s  n） 100 ................................... (1) 9 N 式中： D――病情指数（DI）； s ――各病级代表数值； n ――各病级植株数，单位为株； N――调查总植株数，单位为株。 3.7 抗菌株率计算 抗菌株率按公式（2）计算： R （n 1  n 2  n3）  100 ................................ (2) N 式中： R ――抗菌株率（RF）； n1――水稻品种对单个稻瘟病菌的抗性等级表现为0级的菌株数，单位为株； n2――水稻品种对单个稻瘟病菌的抗性等级表现为1级的菌株数，单位为株； n3――水稻品种对单个稻瘟病菌的抗性等级表现为2级的菌株数，单位为株； N ――调查菌株数，单位为株。 3.8 抗性等级划分 按照表2的规定划分水稻品种对单个稻瘟病菌的抗性等级，按照表3的规定划分参鉴水稻品种对稻瘟 病的抗性等级。 3 DB35/T 1911—2020 表2 病情指数（DI） 抗性等级 0 0 ≤11.1 1 11.2